產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

DNase I，即Deoxyribonuclease I，中文名稱為脫氧核糖核酸酶I，是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA產(chǎn)生單脫氧核苷酸或單鏈或雙鏈的寡脫氧核苷酸的核酸內(nèi)切酶。DNase I水解單鏈或雙鏈DNA后的產(chǎn)物，5'端為磷酸基團(tuán)，3'端為羥基。

DNase I活性依賴于鈣離子，并能被鎂離子或二價(jià)錳離子激活。鎂離子存在條件下，DNase I可隨機(jī)剪切雙鏈DNA的任意位點(diǎn)；二價(jià)錳離子存在條件下，DNase I可在同一位點(diǎn)剪切DNA雙鏈，形成平末端，或1-2個(gè)核苷酸突出的粘末端。

特點(diǎn)： 不含RNase(RNase free)，可以用于各種RNA樣品的處理。提供了用于DNase I失活所需的EDTA。

用途： 制備不含DNA的RNA樣品；RT-PCR反應(yīng)前RNA樣品中去除基因組DNA等可能的DNA污染；體外T7, T3, SP6等RNA Polymerases催化的RNA轉(zhuǎn)錄后去除DNA模板；DNase I footprinting研究DNA-蛋白質(zhì)相互作用；缺口平移(nick translatioin)；產(chǎn)生DNA隨機(jī)片段文庫；細(xì)胞凋亡TUNEL檢測(cè)中部分剪切基因組DNA作為陽性對(duì)照。

活性定義：37℃10分鐘內(nèi)，將能夠完全降解1μg pBR322質(zhì)粒DNA所需的酶量定義為1個(gè)活性單位。
活性檢測(cè)條件：40mM Tris-HCl(pH8.0)，10mM MgSO4，1mM CaCl2，1μg of pBR322 DNA。
純度：不含其它DNA內(nèi)切酶和外切酶，不含RNA酶。
酶儲(chǔ)存溶液：50mM Tris-acetate(pH7.5)，10mM CaCl2，50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X)：100mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃)，25mM MgCl2，1mM CaCl2。

失活或抑制：加入EDTA至終濃度為2.5mM后，65℃加熱10分鐘可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑，達(dá)到毫摩爾/升濃度的鋅離子，0.1%的SDS，DTT、巰基乙醇等還原劑，50-100mM以上鹽濃度均對(duì)DNase I有顯著抑制作用。